System wewnętrznego odbicia, wykorzystujący klasyczną lampę rtęciową jako źródło wzbudzające fluorescencję.
Moduł SIRF firmy Carl Zeiss jest ekonomiczną wersją systemu
 TIRF, pozostając idealnym narzędziem do obserwacji procesów zachodzących na powierzchni błony komórkowej.
W skład systemu wchodzi:
- badawczy mikroskop fluorescencyjny firmy Carl Zeiss
- moduł SIRF
- obiektyw imersyjny olejowy - alpha Plan Fluar 100x/1.45
Zasada działania techniki SIRF
Technika SIRF (analogicznie jak TIRF) opiera się na zasadzie odbicia światła podczas przechodzenia z ośrodka o większej gęstości do mniejszej. Podczas przejścia ze szkiełka nakrywkowego (n1=1.518) do wody (n2=1.33) kąt całkowitego odbicia wynosi 61°.
Przy padaniu światła pod kątem większym od tej wartości obserwowane jest zjawisko fluorescencji, przy czym jej intensywność spada eksponencjalnie wraz ze wzrostem odległości od powierzchni. W praktyce oznacza to, że fluorochromy oddalone od powierzchni nie są wzbudzane, dzięki czemu spada poziom świecenia tła, a poprawia się kontrast obserwacji oraz rozdzielczość w osi Z.
Dla zapewnienia różnicy gęstości ośrodków konieczne jest stosowanie do zaklejania szkiełek mediów na bazie wody.
 |  |
| Klasyczna fluorescencja | SIRF |
|  powrót |