System całkowitego wewnętrznego odbicia, wykorzystujący laser argonowy jako źródło wzbudzające fluorescencję.
Moduł TIRF firmy Carl Zeiss dzięki precyzyjnemu, optycznemu połączeniu lasera z mikroskopem jest idealnym narzędziem do obserwacji procesów zachodzących na powierzchni błony komórkowej, nawet przy niskim poziomie sygnałów.
W skład systemu wchodzi:
- badawczy mikroskop fluorescencyjny firmy Carl Zeiss
- moduł TIRF z laserem argonowym
- obiektyw imersyjny olejowy - alpha Plan Fluar 100x/1.45
Zasada działania techniki TIRF
Technika TIRF opiera się na zasadzie odbicia światła podczas przechodzenia z ośrodka o większej gęstości do mniejszej. Podczas przejścia ze szkiełka nakrywkowego (n1=1.518) do wody (n2=1.33) kąt całkowitego odbicia wynosi 61°.
Przy padaniu światła pod kątem większym od tej wartości obserwowane jest zjawisko fluorescencji, przy czym jej intensywność spada eksponencjalnie wraz ze wzrostem odległości od powierzchni. W praktyce oznacza to, że fluorochromy oddalone od powierzchni nie są wzbudzane, dzięki czemu spada poziom świecenia tła, a poprawia się kontrast obserwacji oraz rozdzielczość w osi Z (rozdzielczość lepsza niż 200 nm).
Dla zapewnienia różnicy gęstości ośrodków konieczne jest stosowanie do zaklejania szkiełek mediów na bazie wody.
 |  |
| Klasyczna fluorescencja | TIRF |
|  powrót |